Stanovení Mustard ELISA - specific je určeno pro kvantitativní stanovení
proteinů hořčice bílé (Sinapsis alba) v potravinách, i tepelně opracovaných.
Soupravou je možné stanovit až 41 vzorků v duplikátech (96 jamková mikrotitrační
destička).
|
Čas
potřebný pro přípravu a extrakci: |
1
hod (10 vzorků) |
|
Čas
potřebný pro ELISA stanovení: |
2
hod 10 min |
|
Limit detekce (LOD): |
0,06
mg/kg (ppm) |
|
Limit kvantifikace (LOQ): |
0,5
mg/kg (ppm) |
|
Rozsah kalibrační křivky: |
0,5
až 15 mg/kg (ppm) |
|
Doba
do exspirace: |
18
měsíců (při 2 – 8 °C) |
Hořčice, jako potravinová ingredience, se připravuje ze semen hořčičných
rostlin. Jedná se zejména o hořčici bílou (Sinapis alba) využívanou pro výrobu
plnotučné hořčice.
Alergie na hořčici je, z pohledu prevalence, pátou až šestou nejčastější
potravinovou alergií. Její výskyt úzce souvisí se spotřebou hořčice v dané
oblasti.
Hlavním alergenem bílé hořčice je protein o molekulové hmotnosti 14 kDa
označovaný jako Sin a 1. Tento alergen je teplotně odolný a nepodléhá ani
enzymatickému štěpení. Minimální dávky proteinu Sin a 1 vyvolávající alergickou
reakci se pohybují v mikrogramových množstvích.
Stanovení je založeno na imunochemické reakci specifické
protilátky s proteiny hořčice bílé. V prvním kroku reagují hořčičné proteiny z
kalibrátoru, kontrolního vzorku nebo ze vzorku – extrakt analyzované potraviny –
se specifickou protilátkou ukotvenou na stěnách jamky mikrotitrační destičky. Po
odmytí nenavázaných bílkovin následuje druhý inkubační krok, při kterém reaguje
specifická protilátka konjugovaná s enzymem – křenovou peroxidázou – s
navázanými proteiny hořčice. Po inkubaci se jamky promyjí a na jamkách navázaná
peroxidáza je detekována přídavkem chromogenního substrátu. Intenzita vzniklého
zabarvení je úměrná koncentraci hořčice v kalibrátorech a vzorcích.
